PANTIP.COM : X5772907 20 cm = งานประจำวันหยุดของอาจารย์สายวิทย์คนหนึ่ง [วิทยาศาสตร์]

ความคิดเห็นที่ 24

17.24 น. ในที่สุดก็ตรวจสอบและแก้ไขงานแปลและเรียบเรียงของ
นักศึกษาเสร็จครับด้านล่างนี้เป็นตัวอย่าง ต้นฉบับ คำแปลของนักศึกษา
และคำแปลที่ผมเรียบเรียงขึ้นใหม่ ซึ่งได้แก้ไขหมดทั้ง 5 กลุ่มแล้ว จะได้
ส่งทางอีเมลล์ไปให้พวกเขาใช้ในการเตรียมสัมมนาต่อไป

ต้นฉบับ

Conclusions

This study has pointed out that the activity of lipases in organic solvent can be increased by low concentrations of 18-crown-6, present in the enzyme solution before lyophilization. Instead, higher concentrations of the additive induce a decrease of enzyme activity. This behavior, which is in agreement with the data reported by Persson et al. (2002) with Humicola lanuginosa lipase, appears related to the fact that the crown ether causes conformational changes that eventually lead to enzyme inactivation. The micronization of the enzyme powder by crown ethers (already found by Santos et al. (2003) with subtilisin), which would lead to a decrease of diffusional limitations, might also be a valid explanation for the increase of the activity of lipases observed in this study. Nevertheless, we have provided evidence for a higher fraction of hydrogen bonds between the enzyme and water molecules, when co-lyophilized with the crown ether, which could explain the enzyme activation in organic solvents at low 18-crown-6/lipase molar ratios. It should be noted that the higher fraction of hydrogen bonds has no effect on the lipase BC enantioselectivity. The increase of E observed with CALB, as a function of 18- crown-6 might be attributed to conformational changes of the enzyme and/or to the presence of the additive in or nearby the catalytic active site. Therefore, 18-crown-6 seems to act by two different mechanisms for the increase of activity (e.g., via protein hydration) and for the increase of the E value (e.g., via enzyme conformational changes or interaction with the active site). These results appear to be consistent with the fact that, more than the goodness of an additive to preserve the enzyme conformation, what is really important to maximize the transesterification activity of enzymes in organic solvents, is the water retained by the protein.

คำแปลและเรียบเรียงของนักศึกษา

บทสรุป

จากการศึกษาแสดงให้เห็นว่า ค่ากิจกรรมของไลเปสในตัวทำละลายอินทรีย์สามารถถูกทำให้เพิ่มขึ้น โดยให้ความเข้มข้นระดับต่ำของ 18-crown-6 ในสารละลายเอนไซม์ก่อนการทำแห้งโดยการแช่เยือกแข็ง แทนที่จะให้ความเข้มข้นระดับสูง เพื่อเหนี่ยวนำให้ค่ากิจกรรมของเอนไซม์ลดลง พฤติกรรมนี้ได้รับการเห็นชอบจากข้อมูลที่รายงานโดย Persson et al. (2002) ซึ่ง Humicola lanuginose ไลเปส ถูกพบว่ามีเกี่ยวข้องกับข้อเท็จจริงที่ว่าเมื่อ crown ether มีการเปลี่ยนแปลงการจัดเรียงตัวส่งผลให้ค่ากิจกรรมของเอนไซม์เกิดการหยุดยั้ง การลดขนาดโมเลกุลของอนุภาคเอนไซม์โดย crown ethers [ซึ่งถูกค้นพบมาก่อนหน้านี้โดย Santos et al. (2003) ด้วย ซับทีลิซิน (subtilisin)] ซึ่งนำไปสู่การลดลงของการกระจายที่จำกัด และสามารถใช้อธิบายค่ากิจกรรมที่เพิ่มขึ้นของไลเปสที่ได้จากการสังเกตในการศึกษานี้ แม้ว่าจะมีหลักฐานสำหรับสัดส่วนที่สูงขึ้นของพันธะไฮโดรเจนระหว่างเอนไซม์และโมเลกุลของน้ำ เมื่อร่วมกับการทำแห้งโดยการแช่เยือกแข็งกับ crown ether ซึ่งสามารถอธิบายค่ากิจกรรมของเอนไซม์ในตัวทำละลายอินทรีย์ ในอัตราส่วนโมลาร์ที่ต่ำของ 18-crown-6/lipase มันควรระบุว่าสัดส่วนที่สูงของพันธะไฮโดรเจนไม่มีผลต่อความสามารถในการคัดเลือกไอโซเมอร์เฉพาะชนิดของไลเปส บีซี การเพิ่มขึ้นของค่า E สังเกตจาก ซีเอแอลบี ซึ่งเป็นฟังก์ชันของ 18-crown-6 ซึ่งอาจจะมีผลต่อการเปลี่ยนแปลงการจัดเรียงตัวของเอนไซม์ และ/หรือ การมีอยู่ของสารเติมแต่ง ข้างในหรือใกล้แอคทีฟไซด์(active site) เพราะฉะนั้นดูเหมือนว่า 18-crown-6 แสดงพฤติกรรมโดยสองวิธีการที่แตกต่างกันสำหรับการเพิ่มขึ้นของค่ากิจกรรม (ตัวอย่างเช่น โปรตีนไฮเดรชัน) และสำหรับการเพิ่มขึ้นของค่า E (ตัวอย่างเช่น การเปลี่ยนแปลงการจัดเรียงตัวของเอนไซม์ หรือ ปฏิกิริยาต่อแอคทีฟไซด์) ผลลัพธ์เหล่านี้ปรากฏเป็นความจริงที่เห็นตรงกันว่า สารเติมแต่งที่มากจะรักษาการเปลี่ยนแปลงการจัดเรียงตัวของเอนไซม์ อะไรคือความสำคัญที่มากสุดของค่ากิจกรรมการย้ายหมู่เอสเทอร์ของเอนไซม์ในตัวทำละลายอินทรีย์ ที่รักษาน้ำไว้โดยโปรตีน

คำแปลและเรียบเรียงของ Prac

สรุปผลการทดลอง

การศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าเราสามารถเพิ่มค่ากิจกรรมการทำงานของเอนไซม์ไลเปสในตัวทำละลายอินทรีย์ โดยเติม 18-crown-6 ที่ความเข้มข้นระดับต่ำลงไปในสารละลายเอนไซม์ก่อนการทำแห้งโดยการแช่เยือกแข็ง แต่ในกรณีที่ใช้ความเข้มข้นระดับสูงจะทำให้ค่ากิจกรรมของเอนไซม์ลดลง พฤติกรรมที่สังเกตได้นี้ตรงกับผลการทดลองของ Persson et al. (2002) ที่ใช้เอนไซม์ไลเปสจาก Humicola lanuginose ซึ่งพบว่า crown ether ทำให้เอนไซม์มีการจัดเรียงตัวใหม่ที่ส่งผลให้เอนไซม์หยุดการทำงาน การลดขนาดโมเลกุลของผงเอนไซม์ไปถึงระดับไมโครเมตรโดยใช้ crown ether [Santos et al. (2003) รายงานมาก่อนหน้านี้แล้วโดยใช้สารซับทิลิซิน (subtilisin)] นั้นจะทำให้การแพร่เป็นไปได้ดีขึ้น ส่งผลให้ค่ากิจกรรมการทำงานของเอนไซม์เพิ่มขึ้นด้วย อย่างไรก็ตามทีมวิจัยของเราพบว่าการทำแห้งแบบแช่เยือกแข็งเอนไซม์ในกรณีที่มี crown ether อยู่ด้วยจะทำให้สัดส่วนพันธะไฮโดรเจนระหว่างเอนไซม์และโมเลกุลของน้ำสูงขึ้น ทำให้อธิบายได้ว่าทำไมค่ากิจกรรมการทำงานของเอนไซม์ในสารอินทรีย์จึงมีระดับเพิ่มขึ้นเมื่อใช้สัดส่วนโมลาร์ของ 18-crown-6/lipase ระดับต่ำ ทั้งนี้พบว่าการเพิ่มสัดส่วนพันธะไฮโดรเจนไม่ได้ส่งผลต่อความสามารถในการคัดเลือกไอโซเมอร์เฉพาะชนิดของเอนไซม์ไลเปส บีซี แต่อย่างใด การเพิ่มค่า E ตามความเข้มข้นของ 18-crown-6 สำหรับเอนไซม์ ซีเอแอลบี อาจเนื่องมาจากรูปร่างเอนไซม์ที่เปลี่ยนแปลงไป และ/หรือ เป็นเพราะมี 18-crown-6 ภายในหรือใกล้กับบริเวณแอคทีฟไซด์ (active site) ของเอนไซม์ ดังนั้นดูเหมือนว่า 18-crown-6 ส่งผลต่อการทำงานของเอนไซม์ได้สองแบบ แบบแรกเป็นการเพิ่มค่ากิจกรรมการทำงานของเอนไซม์ (โดยการเติมน้ำเข้าไปในโปรตีน) และแบบที่สองทำให้ค่า E เพิ่มขึ้น (โดยการเปลี่ยนแปลงรูปร่างของเอนไซม์ หรือการมีปฏิสัมพันธ์กับแอคทีฟไซด์ของเอนไซม์) ผลการทดลองเหล่านี้ยังสอดคล้องกับข้อเท็จจริงที่ว่า สิ่งสำคัญในการเพิ่มค่ากิจกรรมการทำงานของเอนไซม์ในการย้ายหมู่เอสเทอร์ในสารละลายอินทรีย์ คือโมเลกุลของน้ำที่โปรตีนดูดซับเอาไว้ได้ มากกว่าที่จะเป็นบทบาทของสารเติมแต่ง (อย่าง 18-crown-6) ในการรักษารูปร่างของเอนไซม์
แก้ไขเมื่อ 01 ก.ย. 50 17:36:32
แก้ไขเมื่อ 01 ก.ย. 50 17:32:55

จากคุณ : Practical x 2 - [ 1 ก.ย. 50 17:29:21 ]