PANTIP.COM : X12554529 realtime PCR , SYBR RT-PCR, tagman RT-PCR มีความเกี่ยวข้องกันอย่างไรคะ? [วิทยาศาสตร์]

ความคิดเห็นที่ 1

Polymerase Chain Reaction (PCR) เป็นเทคโนโลยีเพื่อที่จะเพิ่มจำนวน DNA จากที่มีจำนวนน้อยมาก ๆ ให้เพิ่มขึ้นทวีคูณตามรอบของปฏิกิริยาที่เพิ่มขึ้นจนสามารถวัดได้

PCR สามารถเพิ่มจำนวน RNA ได้โดยการเปลี่ยน RNA เป็น DNA ก่อน วิธีการนี้เรียนกว่า Reverse Transcription (RT)

RT (Real time)-PCR ในปัจจุบันใช้ชื่อว่า qPCR (quantitative PCR) เพื่อป้องกันการสับสนกับ RT (Reverse Transcription) PCR

qPCR แตกต่างกับ conventional PCR ตรงที่สามารถตรวจวัดจำนวน (copy number) ของ DNA ได้ในแต่ละจำนวนรอบปฏิกิริยาที่เพิ่มขึ้น ต่างกับ PCR ปกติที่จะสามารถวัดจำนวน DNA ได้เฉพาะเมื่อสิ้นสุดปฏิกิริยา (รอบสุดท้าย)

วิธีการที่จะวัด หรือเห็นสาย DNA ได้นั้นจำเป็นต้องใช้ สารที่สามารถจับกับ nucleic acid ในสาย DNA ได้ โดยทั่วไปจะใช้สารเรืองแสงสีเขียว ที่เรียกว่า SYBR green ซึ่งจะสามารถจับกับ nucleic acid ได้โดยไม่จำเพาะ ทำให้บางครั้งอาจไปจับกับส่วนของชิ้นส่วน DNA ไม่สมบูรณ์ที่อาจเกิดขึ้นได้ในปฏิกิริยา PCR ดังนั้นจึงมีเทคโนโลยีที่เรียกว่า Tagman probe ซึ่งจะติดสารเรืองแสงไปกับตัวตั้งต้นปฏิกิริยา PCR ซึ่งเรียกว่า Primer นั่นเอง ทำให้การวัดด้วย Tagman มีความจำเพาะมากขึ้น และยังสามารถตรวจวัด DNA ต่างชนิดกันได้ในคราวเดียวกันหากเลือกสารเรืองแสงสีกันมาติดกับตัว probe แต่ละชนิด จึงเรียกว่า PCR multiplex

พอเป็นข้อมูลคร่าว ๆ สำหรับผู้ที่สนใจ molecular lab ครับ

จากคุณ : Green Baimai (GreenBaimai)

เขียนเมื่อ : 24 ส.ค. 55 06:26:54